关于尿沉渣显微镜检查的规范化

　　现代尿液分析除了理学检验、化学检验外，最重要的是对尿中表形成分的显微镜检查。尿中主要有形成份的各种形态参见附图。但是对于理学检验结果正常、中性粒细胞酯酶和亚硝酸盐试带法结果阴性的尿液，其显微镜检查的价值已被提出了质疑。如有学者提出，试带法结果若符合下列条件就可不做显微镜检查：①白细胞阴性，②红细胞阴性，③蛋白质阴性，④亚硝酸盐阴性。美国临床检验标准委员会(NCCLS)规定凡有下述情况的应进行显微镜检查：①医生提出镜检要求的。②检验科规定的患者(如泌尿科、肾病科患者、糖尿病尿者、应用免疫抑制剂患者及妊娠妇女)。③任何一项理学、化学检验结果异常的。在尿沉渣显微镜检查方法的规范化方面，近年各国又展开了广泛的实验研究，并推出了一系列的操作规程。

　　一、尿沉渣显微镜检查的规范化比较

　　1991年，美国NCCLS提出了“尿液常规分析”的推荐标准(GP16-P)，经过四年的实践，于1995年推出了“尿液分析和尿液标本采集、转运和保存”的标准文件(GP16-A)，其中第五部分“尿液显微镜检查”作了规定。日本临床检验标准委员会(JCCLS)也在1995年提出了“尿液沉渣 检查”的标准文件(GP1-P2)，两种文本主要内容的比较见附表。

　　我国在80年代曾提出过尿液沉渣显微镜检查的规范，并在1995年的中华医学检验学会临床血液学检验与尿分析专题研讨会上进行了修订，其操作规程主要内容为：取尿液10ml，以相对离心力400g，离心5分钟，剩余沉渣液0.2ml，混匀吸沉淀物20µl，滴入载玻片上，用18mm×18mm盖玻片覆盖后镜检，先用低倍镜(10倍目镜×10倍物镜)观察全片，再用高倍镜(10倍目镜×40倍物镜)仔细观察，细胞成分需观察10个高倍视野(HP)，管型需观察20个低倍视野(LP)，报告方式：XX个细胞/HP，或XX个管型/LP。同时建议逐步使用一次性专用的尿沉渣 定量检测板，采用XX个细胞(或管型)/µl的报告方式。1997年，中华人民共和国卫生部医政司又出版了《全国临床检验操作规程》第二版，对于尿沉渣检查作了具体的规定。由此可见，对于离心的尿量、盖玻片和载玻片大小、显微镜视野大小、观察视野数、结果报告方式等，我国和美国、日本等国均已作出了相应的规定。虽然各国的规定存在一定的差异，但相同的主要目的都是使尿沉渣显微镜检查的操作规范化，使结果更精确、更准确、更具有可比性、更符合患者和临床实际。

　　附表 尿沉渣显微镜检查规范操作比较

　　NCCLSJCCLS中国

　　标本要求

　　标本量

　　离心管

　　离心机要求

　　离心时间

　　离心力

　　留取沉渣量

　　检查量

　　载玻片和盖玻片规格

　　显微镜要求

　　镜检观察要求

　　染色要求

　　结果报告方式推荐晨尿，放置时间不超过2小时

　　10ml,12ml,15ml

　　透明的、塑料或玻璃的、带刻度的、有盖的、尖底的一次性试管

　　带自动锁盖的、恒温的、水平式离心机

　　5分钟

　　400g(其中，半径是指离心机中轴至离心管底部的距离)

　　依照厂商的产品而定

　　依照厂商的产品而定

　　依照厂商的产品而定

　　普通光学显微镜

　　推荐采用湿片法

　　推荐活体染色

　　推荐采用每毫升尿有形成分数量来表示推荐放置时间不超过2小时

　　10ml

　　透明的、塑料或玻璃的，带10ml、0.2ml刻度尖底试管

　　水平式离心机

　　5分钟

　　500g(其中，半径是指离心机中轴至离心管底部的距离)

　　0. 2ml

　　15µl

　　75mm×26mm,

　　18mm×18mm

　　普通光学显微镜

　　推荐采用湿片法，观察视野数目20-30个，不少于10个

　　不必采用染色

　　以视野均值报告推荐晨尿，放置时间不超过1小时

　　10ml

　　带刻度离心管

　　5分钟

　　1500r/min

　　0. 2ml

　　20µl

　　18mm×18mm

　　普通光学显微镜

　　推荐采用湿片法，观察视野数目，细胞成分为20个高倍视野，管型为10个低倍视野

　　细胞成分以每高倍视野最低至最高值报告;管型以每低倍视野均值报告

　　二、尿沉渣显微镜检查应引起注意的问题

　　1. 标本问题 尿沉渣镜检通常推荐采用晨尿，原因是晨尿最浓缩、能最大程度的反映有形成分的情况。近年，有学者提出采用晨间第二次尿液，即留取早上8点至9点钟尿液，避免因标本室温存放时间过长、细菌生长、蛋白分解、氨升高而使细胞、管理等有形成分破坏。

　　2. 染色问题 有的推荐采用活体染色，如Sternheimer-Malbin染色、0.5%甲苯胺蓝染色，有助于细胞和管型的鉴别。对于尿中脂肪和结晶的鉴别，推荐采用偏振光显微镜，亦可用特殊染色，如脂肪、卵圆脂肪小体的油红O、苏丹Ⅲ染色。细菌的革兰、巴氏染色，嗜酸性粒细胞的Hansel染色、Wright、Giemasa染色、巴氏染色，含铁血黄素颗粒的普鲁士蓝染色等。有的认为尿沉渣检查不必染色，因为有些染液会引起溶血，或因大量染液而稀释标本。

　　3. 使用标准化尿沉渣检查器材的问题 目前，推荐采用商品化沉渣检查器材的呼声越来越高，原因是这些装置具有检查尿量、离心力、离心时间、留取沉渣量、检查量、报告单位等统一的特性，可保证检查结果的精密度、准确度良好。

　　4. 显微镜检查和结果报告问题 有的推荐显微镜检查应在较弱光线下进行，这较容易观察管型(如透明管型)和异形红细胞，当发现可疑成分时要由高级检验员复核。所有的显微镜检验结果必须和理学、化学检验结果符合，反之亦然。若存在不一致的结果，应在最终报告之前解决这类问题。

　　总之，尿液沉渣显微镜检查至今仍是一项非常有价值的临床试验，其检查操作的规范化将有利于临床疾病诊断和疗效观察，应使临床医师充分认识和配合，更应引起检验科工作人员高度重视和认真执行。

（实习编辑：陈战锋）