骨髓细胞形态学检查质控

　　由于骨髓检查专业性和技术性较强，不仅需要细胞形态学、细胞化学、细胞免疫学和细胞遗传学等实验室知识和技术，而且还需要较广泛的临床血液病知识，因此交流骨髓细胞形态学检查经验十分必要。

　　1.一般质量要求

　　1.1 载玻片的要求

　　载玻片的厚薄，清洁光滑和陈旧程度都会影响检查的结果，推荐使用1～1.2 毫米 厚度：25.4×76.2 毫米长度的载玻片。新玻片表面有游碱质，必须用1mol/L HCl 浸泡24小时后再用清水彻底清洗、干燥后备用。旧玻片用含氯消毒剂浸泡24小时后加入合成洗涤剂煮沸20分钟，再用热水将血膜洗去，用清水冲净干净，干燥备用。必要时，可将其用95%乙醇浸泡1小时，脱净载玻片油脂，用蒸馏水洗净后，干燥备用。

　　1.2 骨髓涂片的要求

　　一张良好的骨髓涂片，要求厚薄适宜，体尾分明、边缘整齐，细胞分布均匀。髓膜长度占载玻片的1/3左右，推片厚度应适当参考外周血计数，如白细胞计数升高明显和外周血分类出现幼稚细胞者，应当适当推薄片。而三系减少患者应当适当推厚片。每一受检病例骨髓涂片均应该在8～1O张，以便存档和做组织化学染色。

　　1.3 骨髓片的接受和编号登记

　　每张涂片中都应注明患者的姓名、取材日期、编号，血片以PB、骨髓片用BM表示。每份骨髓标本都应认真核对申请患者的姓名、性别、年龄、床号、住院号等，并做好骨髓编号，登记工作，以便查找和档案管理。

　　1.4 染色

　　染色剂以Wright混合染色为佳。染液以覆盖骨髓膜为宜，染色时间长短与增生程度、髓膜厚度和室内温度有关，增生程度高、髓膜厚、室内温度低染色时间长、反之则染色时间短。染色效果，一般以加入第二液后低倍镜下观察到清晰分辨出中性分叶核后，流水冲洗干后镜检。

　　2.细胞分类要求

　　选择体尾交界部或成熟红细胞单个排列处进行细胞分类：计数200～400个有核细胞。巨核细胞计数低倍镜下计算总数，油镜下进行分类，计算各类巨核细胞积分比例。

　　3.血细胞化学染色方法和意义

　　血细胞化学染色是以形态学为基础，结合化学和生物化学技术，对血细胞各化学成分，代谢产物作定位、定性、半定量和定量观察的方法。主要有过氧化物酶染色、中性粒细胞碱性磷酸酶染色、酯酶染色、糖原染色、铁粒染色。过氧化物酶染色主要是帮助鉴别急性白血病的类型。中性粒细胞碱性磷酸酶染色主要用于：(1)慢性粒细胞白血病与中性粒细胞类白血病反应的鉴别。(2)阵发性夜间血红蛋白尿(PNH时)与再生障碍性贫血的鉴别。(3)急性白血病类型的鉴别。(4)细菌与病毒性感染的鉴别。酯酶染色主要用于鉴别急性白血病类型。糖原染色主要用于：(1)鉴别幼稚红细胞增生的性质。(2)鉴别白血病类型。铁染色只要用于鉴别缺铁性贫血与非缺铁性贫血。以及诊断铁粒幼细胞性贫血。

　　4.报告的时间和诊断

　　报告时间：一般常见病骨髓片8 小时内发出比较恰当，疑难骨髓片48小时内发出，临床急于了解病情可以口头或电话方式简单报告，但以正式报告为准。一般常见病骨髓报告由一名有经验检验者阅片后即可报告，疑难片最少需要2名有经验检验者共同阅片，甚至进行全科讨论或者与患者所在科室临床医生进行沟通，结合临床骨髓形态学和其它相关检查，进行综合分析，加以诊断。

　　5.骨髓细胞分析仪的使用要求

　　采集的图像一定要有代表性，要求细胞图像清晰和真实，不能随意扩大或缩小细胞的大小。

　　6.参加骨髓细胞形态学质量控制

　　建立技术考核标准，定期参加室内质量控制。通过参加骨髓检查室间质评，使科室在血液病细胞形态学方面积累和增加一些经验和知识，从而提高日常骨髓报告的能力。

　　7.档案的保存

　　我室骨髓细胞形态检查档案保存采用二种方或同时进行。传统方式：手工编号，填写相关资料，保存原始申请单和报告单。优点：骨髓涂片和组织化学染色保存完整，便于今后阅片和带教，总结资料。缺点：需要较大场地，查找不便。细胞图象技术，优点：报告图象直观，便于保存，查找方便，便于进行统计量。缺点：采集图象存在局限性，带教不便。

（实习编辑：陈战锋）