糖尿病并发症的实验室检测

　　(一)体液葡萄糖的检测

　　酶法为推荐使用的测定方法(如：己糖激酶法或葡萄糖氧化酶法)。

　　1. 标本收集和贮存

　　大多数临床实验室采用血浆或血清测葡萄糖浓度，而大多数床旁测定葡萄糖的方法使用的是全血。使用不同的标本应采用不同的参考值。

　　室温下，血细胞中进行的糖酵解使血中葡萄糖减少，在获得标本后应尽快测定。

　　通过向标本中加碘乙酸钠或氟化钠可抑制糖酵解作用，使血葡萄糖在室温下稳定3天。

　　2. 已糖激酶法

　　(1)原理：在有已糖激酶(hexokinase)和Mg2+存在下，葡萄糖被ATP磷酸化为6-磷酸葡萄糖。在NADP+参与下，葡萄糖-6-磷酸脱氢酶将6-磷酸葡萄糖氧化为6-磷酸葡萄糖酸，同时NADP+转变为NADPH+H+。NADPH生成量与标本中葡萄糖含量成正比，可以在340 nm波长监测NADPH吸光度变化，定量葡萄糖。用从酵母中获得的G-6-PD，需NADP+作为辅因子。如使用细菌来源的G-6-PD，则以NAD+作为辅因子，NADH的生成量也在340nm测定。

　　(2)评价：该法准确度和精密度高，特异性高于葡萄糖氧化酶法，适用于自动化分析，为葡萄糖测定的参考方法。轻度溶血、脂血、黄疸、氟化钠、肝素、EDTA和草酸盐等不干扰本法测定。

　　3. 葡萄糖氧化酶法

　　(1)原理：葡萄糖氧化酶(glucose oxidase, GOD)催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸和过氧化氢(H2O2)，再加入过氧化物酶和色原性氧受体(如联大茴香胺，4-氨基安替比林偶联酚)，生成有色化合物，比色定量。

　　(2)评价：GOD高特异性催化β-D-葡萄糖。而葡萄糖α和β构型各占36%和64%。要使葡萄糖完全反应，必须使α-葡萄糖变旋为β-构型。某些商品试剂中含有变旋酶，可加速变旋过程。也可延长孵育时间，通过自发性变旋来转化。过氧化物酶的特异性远低于GOD。尿酸、维生素C、胆红素、血红蛋白，四环素和?a href="http://xbk.39.net/xbk/9b445.html" target="_blank" class=blue>入赘孰牡瓤梢种瞥噬从?通过与H2O2竞争色素原受体)，用Somogyi过滤可以除去大部分干扰物质。

　　4. 尿葡萄糖测定

　　尿糖检测快速、廉价和无创伤性，适用于大规模样本的筛选。

　　(二)酮体的检测

　　酮体(ketone bodies)由乙酰乙酸、β-羟丁酸和丙酮组成。最主要的来源为游离脂肪酸在肝脏的氧化代谢产物。

　　由于尿酮体检测的方便性，已广泛用于1型糖尿病的病情监测。

　　尿酮体测定：Acetest和Ketostix法都适于对尿酮体的测定。其特异性和灵敏度与测定血清时相同。

（实习编辑：陈战锋）