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Front Immunol:免疫复合物介导的膜性增生性肾小球肾炎和C3肾小球疾病患者血清FHR-5水平及CFHR5基因变异

2022-01-19 00:00:04梅斯医学

背景:因子H相关蛋白5(FHR-5)是补体因子H蛋白家族的成员。由于与替代途径的主要补体调节因子H的同源性,它也可能与肾脏疾病的发病机制有关,在肾脏疾病中,因子H和替代途径失调起作用。在此,我们首次报道了免疫复合物介导的膜增生性肾炎(IC-MPGN)和补体C3肾小球病变(C3G)患者CFHR5和血清FHR-5水平的变化以及临床、遗传学、补体和随访资料。

方法:共120例经组织学证实为IC-MPGN/C3G的患者纳入研究。ELISA法检测血清FHR-5水平,Sanger测序分析CFHR5基因,筛选出的突变体作为重组蛋白进行ELISA和表面等离子共振(SPR)研究。采用自制ELISA法检测FHR-5血清水平。用1mg /ml的市售单克隆小鼠抗人FHR-5 (IgG1,克隆#390513,R&D Systems,明尼阿波利斯,明尼苏达州,美国)包被磷酸盐缓冲盐水(PBS)过夜,次日用PBS和2%的牛血清白蛋白(BSA)阻断。血清在含1% BSA和0.05% Tween-20的PBS中按1:100稀释,加入平板中[1 h,室温(RT)]。采用山羊抗人FHR-5 IgG (Cat。编号:AF3845,研发系统,明尼阿波利斯,明尼苏达州,美国)。样品浓度根据2倍稀释系列重组人FHR-5蛋白(R&D Systems,明尼阿波利斯,明尼苏达州,美国)的标准曲线确定。试验间和试验内的差异分别为11.8%和7.8%。经Western blot (WB)检测,FHR-5 ELISA的特异性得到证实,单克隆抗FHR-5作为捕获抗体,未检测到FHR-5以外的FHR。

结果:14例患者(12.6%)观察到8个CFHR5外显子变异。患者血清FHR-5水平低于对照组。初诊时血清FHR-5浓度较低与随访期间肾脏存活率较好有关;此外,它与补体过度激活的迹象和有临床意义的簇有明显的相关性。

结论:FHR-5蛋白可能在IC-MPGN/C3G的发病机制中起微调作用。

原文出处:Garam N,  Cserhalmi M,  Prohászka Z,et al.CFHR5FHR-5 Serum Levels and  Genetic Variations in Patients With Immune Complex-Mediated Membranoproliferative Glomerulonephritis and C3-Glomerulopathy.Front Immunol 2021;12

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