北京和平中西医结合医院

北京治疗尖锐湿疣比较好的医院,北京尖锐湿疣专科医院排行

2023-09-25 10:43:03

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  尖锐湿疣基因诊断方法

  迄今,HPV难于用传统的病毒培养及血清学技术检测,主要实验诊断技术是核酸杂交。近年来发展的PCR方法具有特异、敏感、简便、快速等优点,为HPV检测开辟了新途径。

  (一)标本的采集及处理

  1.标本的采集和预处理:用刮板或生理盐水浸润的棉棒从阴道和宫颈外口取分泌物和细胞。在作细胞学检查的同时,将标本放入5ml含有%硫柳汞的PBS中,用PBS离心(3000g,10min)洗涤2次,沉积细胞重悬于1mlPBS中,取细胞悬液抽提DNA。

  2.标本核酸的提取:按1体积细胞悬液加10倍体积的细胞裂解液(10mmol/L Tris-HCl,pH ,10mmol/L EDTA,150mmol/L NaCl,%SDS,/ml蛋白酶K)37℃下处理过夜;且等体积酚/氯仿(1:1),氯仿/异戊醇(24:1)各抽提2次;加1/10体积3mol/L NaAc(pH )及倍体积无水乙醇置-20℃ 2h或过夜沉淀DNA;加1体积乙醇洗涤1次;用60μl含RNA酶(100μg/ml)的TE液(10mmol/L Tris-HCl,pH ,/L EDTA)溶解DNA,37℃温育30min。

  (二)PCR扩增

  1. 引物设计和合成:HPV基因组可分为早期区(E)和晚期区(L),每区含一系列开放读码框架(ORF)。序列分析表明,各型HPV的非编码区及E1、E6、E7和L1区均有保守序列。Manos等从HPVL1区中选择保守序列设计合成引物MY11和MY09见表1,该引物与HPV 6、11、16、18及33型有互补序列,也可扩增其它型HPV。

  北京治疗尖锐湿疣比较好的医院,北京尖锐湿疣专科医院排行,尖锐湿疣早期症状不太明显也导致很多人在感染后不知道患病了,一般早期特征主要呈现为淡红色的丘疹,很容易被误认为是普通的疙瘩,但随着时间推移这些疙瘩会越来越大,形成菜花状疣体,而且疣体一旦破裂还会造成其他部位感染,甚至是肛门、口腔等等。

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