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流式细胞怎么检测

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流式细胞怎么检测

流式细胞是比较先进的一类检测,具有速度快,精度高,准确率好的优点.流式细胞分析是指使用流式细胞仪进行细胞组分的分析,可分析血细胞以及骨髓细胞等,是用来检测耐药性,基因型以及细胞良恶性病变情况。流式细胞怎么检测呢?

流式细胞术检测细胞胞膜分子,细胞处理计数后,用细胞洗液(含2%BSA的PBS)重悬细胞,使细胞浓度为1×107/,空白对照、同型对照、待测样本每管取100uL上述重悬的细胞,使每管细胞数达到1×106/管,空白对照管不加抗体,同型对照管和待测样本管分别加入5-20uL同型抗体和靶标抗体(具体使用量参照说明书),充分混匀,至4℃孵育30min或冬季可至于室温孵育30min,孵育期间每隔10min晃动一下反应管,使细胞和抗体充分反应,加入适量细胞洗液,1000rpm离心5min,弃上清,反复洗涤2次。

使用100μL细胞洗液重悬细胞,同型对照管和待测管分别加入适量的荧光标记的二抗,充分混匀,至4℃避光孵育30min或冬季可至于室温避光孵育30min,孵育期间每隔10min晃动一下反应管,加入适量细胞洗液,1000rpm离心5min,弃上清,反复洗涤2次,使用100-200μL细胞洗液重悬细胞,先测空白管和同型对照管,再测待测管。

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2023-04-06浏览54268举报/反馈
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