麻风病皮肤查菌操作规程

　　一、器材和染色液配制：

　　1.刀片、刀柄规格可按习惯选用，刀尖必须锐利，每处取材前须经火焰烧灼灭菌，并用酒精棉球擦净，冷却后使用。

　　2.载玻片，要求光滑无划痕，洁净无油脂，最好预先在正面一端用铅笔编上号。初诊和可疑患者查菌时最好用新的洁净玻片。

　　3.染色液配制：

　　①石碳酸复红溶液：

　　硷性复红酒精饱和溶液10毫升(硷性复红5～10克加95%酒精100毫升)

　　5%石碳酸溶液90毫升。

　　②1%盐酸酒精：浓盐酸1毫升70%酒精99毫升

　　③硷性美兰溶液：美兰酒精饱和液30毫升(美兰2克加95%酒精100毫升)

　　10%氢氧化钾溶液0.1毫升，蒸馏水100毫升附注：

　　1.石碳酸复红液配好后，需经过滤后方能使用。

　　2.硷性复红(Basic fachsin)又称硷性品红。美兰又称次甲基兰或亚甲兰(Methylene blue)

　　二、取材：

　　1.取材部位：瘤型病人(包括BL和BB)应选取6处，眶上、颧部、下颔和耳垂各一处，皮损2处。结核样型(包括BT)和未定类病人可酌情选取皮损2—3处。但在初诊和最后判定是否达到临床治愈时，应按对瘤型病人的要求进行取材。

　　皮损取材应选择在损害最活跃处，如：环状损害应选择其红色边缘，隆起的斑块应选择最高起处，弥漫浸润损害选择浸润显著处，结节取其中心部。取材部位应准确，疗效观察病人取材部位数应前后一致。

　　2.取材部位经消毒后，用手指或适当的夹持工具将局部提取，并逐渐捏紧至无血色，如有瘀血，可用刀柄轻轻驱散。

　　3.用刀尖迅速刺入皮肤作一深2—3毫米、长3—5毫米之切口，用刀刃迅速刮2—3次，采取组织浆液。切口在手指或夹持工具松开后，立即用胶布或棉球加压止血。

　　4.在玻片的确定位置上，用刀尖上的组织浆液作一适当大小的涂膜(直径6毫米左右)。要求涂膜均匀，厚薄适当。组织浆不应混有血液。

　　5.涂膜自然干燥后，在酒精灯火焰上固定(以不烫手为宜)。

　　6.固定后及时染色。

　　三、染色：

　　1.加石碳酸复红液于涂膜上，用酒精灯加温至染液出现蒸气。维持此状态五分钟。要注意不使染色液沸腾或干涸，染液将干时，要及时补加染液。

　　2.以清水缓慢冲去染液，滴加1%盐酸酒精，摇动玻片，使涂膜脱至微带粉红色为止。时间一般约30秒钟左右(对未达要求者可反复脱色)。

　　3.水洗后加硷性美兰液复染半—1分钟，水洗自然干燥，镜检。

　　四、镜检：

　　1.染色后应尽可能及时镜检，如不可能，标本应保存在标本盒内。避免灰尘和光照。

　　2.显微镜要视野清晰，分辨率高;物镜用90×或100×油浸镜头，目镜以5—10×为宜。

　　3.为了减少涂膜中因细菌分布不匀造成的误差，应选一定顺序多检几个区域。

　　4.镜检结果，按所定标准记录。

（责任编辑：叶惠玲）