儿童微小病变型肾病综合征致病相关基因筛查

　　MCNS 是特发性NS 的主要病理类型。根据患者对肾上腺皮质激素(激素) 治疗的反应,将其分为激素敏感型和激素抵抗型两类。Shalhoub 提出T 细胞功能异常而分泌某些循环淋巴因子作为毒性物质损伤肾小球基底膜进而导致MCNS ,可能是对MCNS 发病机制的最早探讨。此后,临床亦发现不少MCNS 发生可能与细胞免疫异常有关的证据。MCNS 肾小

　　球内一般无免疫球蛋白沉积,多数患者对免疫抑制药和细胞毒药物如激素、环磷酰胺等治疗反应良好,某些影响细胞免疫病毒感染如麻疹病毒感染可诱导本病缓解,临床已有采用其灭活减毒疫苗作为佐剂配合激素治疗NS 研究报道;某些T细胞功能异常疾病,如霍奇金病并MCNS 等。

　　Lagrue 等研究发现植物凝集素或刀豆蛋白A 刺激NS患者外周血分离淋巴细胞释放一种血管通透因子,增加血管通透性,并引起大量蛋白尿,并在鼠类动物模型及体外细胞培养中得以证实。进一步研究证实血管通透因子来源于T 淋巴细胞。血管通透因子可能属于激肽系统中的活性因子,其相对分子质量为1 000～12 000 ,提示血管通透因子可能不是单一成分。Toyabe 等通过消减杂交技术确定7 个基因在NS 患儿中存在表达差异,推测IgE2依赖性组胺释放因子可能参与儿童NS 发生 。另有研究表明,与肾损伤修复过程相关血管内皮生长因子可能在MCNS 中扮演重要角色。尽管血管通透因子性质未完全确定,但其存在和作用却不断被实验

　　所证实。因此,本课题以MCNS 患儿PBMC 为研究对象,首次利用包含Affymetrix 公司的Human Genome U133 ArraySet 基因表达谱芯片筛选MCNS 相关的致病基因,并依据各相关基因在MCNS 中的表达谱改变来初步分析其与MCNS 的可能关系。结果发现,969 个基因在MCNS 患儿PBMC 中表达差异显著,其中表达上调的552 条,表达下调417 条。这些基因有些是MCNS 发生的参与因子,有些是其发生发展过程的介导分子,有些则是MCNS 诱发的继发性分子。

　　本课题同时还采用RT2PCR 和荧光实时定量PCR 法来分析部分基因表达变化,其结果与基因表达谱芯片较一致,一方面证实基因芯片检测结果在本课题中的客观可信性,也从另一侧面证实这些基因与MCNS 的相关性。上述差异表达的基因涉及免疫、代谢、细胞周期调节、细胞增殖和凋亡、细胞信号转导等多个方面,亦证实MCNS 的发生发展涉及到多个基因改变,是具有不同功能的多基因相互作用结果。同时,作者还将进一步深入研究差异表达基因在MCNS 中的作用,以筛查出MCNS 的相关致病基因或潜在的“血管通透因子”。

（实习编辑：吴晓薇）