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取消关注PCR即聚合酶链反应,是一种用于检测微量核酸的方法,广泛应用于临床上多种病毒感染的辅助诊断。具体操作是将模板DNA聚合酶链催化扩增,经过高温组装成聚合酶链反应系统进行分析,判断是否存在病毒感染。
1、制片:PCR检测是将待检测细胞取一定量,放入聚丙烯酰胺小钻空针,在DNA聚合酶作用下,缓慢加入模板DNA,统计处理,得到结果。采集的标本应置于10%的甲醛溶液中,使细胞核内的DNA保持稳定,然后用显微注射器吸收DNA,并进行后续处理;
2、检测:在模板DNA聚合酶链反应系统中加入足量的引物,可使引物在MGM过程中充分表达,同时引物也可以改变膜表面的蛋白质,从而改变膜表面的负电荷,通过检测膜蛋白的突变情况,判断是否存在病毒感染;
3、分析:分离出病毒片段后,进行分析,可判断是否存在病毒感染,一般需检测出的病毒片段数,即阳性结果表示感染病毒,或阴性结果则没有感染病毒;
4、结果判读:一般是根据显微镜下的检查判断,如检查到达E1和E2峰,则表明病毒处于活动期。如果检查到达A1峰,则表明病毒处于静止期。若检查到达B1峰,则表明正处于感染早期。一般需根据PCR检测的结果,结合患者的症状,以及肝功能、肝彩超等其他检查,综合判断患者是否存在病毒感染。
目前,乙肝病毒检测方法主要包括乙肝两对半、乙肝DNA、乙肝五项,以及甲胎蛋白等。但由于PCR的灵敏度低,因此不推荐用于感染乙肝的诊断,一般需进行乙肝两对半定性检查。另外,在检测肝功能时,应同时检测血清中的转氨酶和胆红素的情况,以判断肝细胞的损伤程度,进而评估肝脏的功能。
副主任医师
广州市第八人民医院 肝病科
主任医师
鹰潭市人民医院 肝病科
主任医师
广东省中医院珠海医院 肝病科
主任医师
荆州市第二人民医院 肝病科
主任医师
甘肃省中医院 脾胃病二科、肝病科