绞股蓝总皂苷外用对高血脂小鼠的降血脂作用研究

　　绞股蓝为葫芦科植物绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum Makin)的多年生落叶草质藤木，又名七叶胆、七叶参等，早在我国《救荒本草》中已有记载。绞股蓝广泛分布于亚热带，我国有15种3个变种，多分布于秦岭和长江以南地区海拔1000～2000m山地。绞股蓝含有多种皂苷，如人参皂苷Rbl，Rb2，Rb等，还含有黄酮类、糖类、脂肪及锌、硒等多种无机元素。现代药理证明绞股蓝的主要药效成分为绞股蓝皂苷，具有抑制肿瘤、防止衰老、降低血脂、增强免疫、抗溃疡等药理作用，广泛应用于治疗气管炎、传染性肝炎以及防治神经、循环、血液、内分泌、消化系统疾病。绞股蓝皂苷具有良好的降脂作用。为了探讨绞股蓝皂苷局部用药对高血脂的影响，本实验对绞股蓝总皂苷外用对高血脂小鼠的降血脂作用进行了研究。

　　1实验材料

　　试剂药品：供试绞股蓝(Gynosterruna pentaphyllum Makin)采取神农架绞股蓝GAP生产基地。

　　动物：KM小鼠，18～22g，华中科技大学同济医学部实验动物中心提供。合格证号：19—052。

　　仪器：低温血动平衡离心机(北京医用离心机厂)、真空冷冻干燥箱(美国Labconco公司)、电子天平[梅特勒一托利多仪器(上海)有限公司]、恒温水浴锅(上海精宏实验设备有限公司)。

　　2实验方法与结果

　　2.1 绞股蓝总皂苷提取的制备

　　2.1.1 提取：取绞股蓝干草100g粉碎，以8倍量的80%乙醇回流3次，每次2小时，合并滤液回收乙醇，以水混悬。石油醚脱酯，正丁醇萃取，萃取液回收正丁醇，以水溶解，上已处理好的AB一8大孔吸附树酯柱，用蒸馏水洗至Molisch阴性。再用95%乙醇将绞股蓝总皂苷洗脱，回收乙醇，冷冻干燥成粉末，得浅黄色绞股蓝总皂苷，得率5.47%。

　　2.1.2含量测定：对照品溶液的制备 精密称取于60℃，减压干燥3小时的绞股蓝皂苷-A对照品适量，加甲醇溶解，制成每lml含2mg的溶液。

　　供试品溶液的制备：精密称取本品50mg，加甲醇溶解，制成每lml含2mg的溶液。

　　测定法：精密吸取对照品溶液及供试品溶液各100ul，分别置15ml具塞试管中，精密加入新鲜配制的含5%香草醛冰醋酸溶液与高氯酸(2.8V/V)的混合液2ml，摇匀，密塞，置60℃水浴中加热15min，取出，立即放入冰水中冷却2min，精密加入冰醋酸10ml，摇匀，以试剂作空白，于555nm波长处测定吸收度。按干燥品计算含总皂苷以绞股蓝皂苷-A计，为89.2%。

　　2.1.3药物配制

　　绞股蓝皂苷内服药：称取O.27g，溶解于30ml蒸馏水。 绞股蓝皂苷外敷药(低浓度)：取0.27g，溶解于hnl甘油，然后加入30g雪花膏，混匀。

　　绞股蓝皂苷外敷药(高浓度)：取0.54g溶解于lml甘油，然后加入30g雪花膏，混匀。

　　阳性对照药：取维生素E烟碱酯粉末O.7g溶于40ml蒸馏水，混匀。

　　2.2高血脂症小鼠动物模型构建

　　高脂饲料组成：基础饲料(面粉25，玉米面20，麦片25，豆饼粉12，鱼粉8，骨粉2，酵母粉2，精盐1)84.5%，蛋黄粉10%，猪油5%，胆酸钠0.5%。取小鼠饲养10天。

　　分组：小鼠随机分成6组，每组10只，雌雄各半。绞股蓝皂苷内服组灌胃给予绞股蓝皂苷;绞股蓝外敷组将每只小鼠腹部的毛修剪干净，外敷绞股蓝皂苷;阳性对照组灌胃给予维E烟碱酯;模型组灌胃给予生理盐水，以高脂饲料饲养;空白对照组灌胃给予生理盐水，以基础饲料饲养。

　　上述动物自由饮水，隔天称重1次，喂养7天后禁食12h，眼眶后静脉丛采血，分离血清，检测胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)。结果见表1。

　　结果显示，绞股蓝皂苷内服外用不同给药途径给药均能显著降低实验型高血脂动物甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白含量;提高高密度脂蛋白与低密度脂蛋白比率;降低动物体重。

　　3讨论

　　绞股蓝含有多种皂苷，其皂苷具有降低血脂、增强免疫、抗溃疡等多种药理作用。本研究表明绞股蓝皂苷外用能显著降低实验型高血脂动物甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白含量;提高高密度脂蛋白与低密度脂蛋白比率;降低动物体重。绞股蓝皂苷的临床应用目前主要为内服，而将其制成外用制剂。可以针对脂肪在体内的不均匀分布，进行局部降脂。以满足降脂、调脂瘦身不同用药目的需要，为绞股蓝皂苷的进一步利用提供了一条新的途径，有利于更好地利用绞股蓝皂苷为人们健康服务。