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取消关注卵巢颗粒细胞瘤的组织学形态多种多样,且常混合存在,所以给组织学分级带来了一定的困难,目前尚无公认的统一标准。肿瘤的组织学分级则是病理学上用于评价肿瘤恶性程度及预后的可靠的参考指标。Philip等和李瑛氏分别提出了针对卵巢GCT的组织学分级标准,而AMH则与卵巢的早期定向分化有关,并且是卵巢GCT敏感、特异和可靠的标志物之一。本实验用AMH在卵巢GCT的表达水平和相关的统计学方法对两种组织学分级标准进行评价,以用于病理学对卵巢GCT的预后评估。
1 材料与方法
1.1 材料
40例卵巢GCT石蜡标本来源于山西医科大学第一临床医院1998~2009年的病理档案。卵巢GCT患者年龄15~70岁,平均45.5岁;<30岁13例,30~50岁11例,>50岁16例;病变均为单侧(左21例,右19例)。所有病例均有完整的临床病理资料。
1.2 方法
调取相应蜡块重新制作HE切片,光镜下复查以确定诊断。按2000年FIGO标准进行临床分期,卵巢GCTⅠ期22例,Ⅱ期13例,Ⅲ期5例,其中,Ⅰa期13例,Ⅰc期9例;Ⅱb期4例,Ⅱc期9例;Ⅲb期2例,Ⅲc期3例。组织学分级按李瑛氏分级标准:Ⅰ级为高分化,21例,Call-Exner小体多见,细胞分化好;Ⅱ级为中分化,13例,瘤细胞少有异型性,核分裂象少,少或无Call-Exner小体;Ⅲ级为低分化,6例,瘤细胞有明显异型性,核分裂象多,无或少Call-Exner小体。按Philip J等的标准分级(根据组织学类型):Ⅰ级为分化良好,20例,可以有多种表现形式;Ⅱ级为中等分化,17例,表现为一种弥散的形式,也称肉瘤样;Ⅲ级为低分化,3例,几种组织类型的混合。
1.3 免疫组化试剂及方法
AMH单克隆抗体及二抗广谱型PV-6000,均购于北京中杉金桥生物技术有限公司,抗原修复采用高压热修复法。每次实验均设阳性对照和阴性对照,选取正常卵巢组织作为阳性对照,以PBS代替一抗作为阴性对照。
1.4 结果判定
颗粒细胞的胞质无棕黄色颗粒为AMH阴性表达,有棕黄色颗粒为阳性表达,根据染色强度及阳性细胞的多少,将阳性分为,弱阳性( ):仅在高倍显微镜(HPF)下看到,10个高倍视野的阳性细胞平均数≤25%;强阳性( ):着色深,低倍镜下显而易见,阳性细胞平均数≥50%;阳性( ):介于弱阳性与强阳性之间。
1.5 统计学处理
应用SPSS 11.5软件对数据进行χ2检验、Fisher确切概率法检验和Spearman秩相关检验,以α=0.05为检验水准。