2010-08-24 来源:
速效心痛滴丸是由牡丹皮、川芎、冰片组成的复方制剂,具有清热凉血、活血止痛的功效。我们选择冰片及牡丹皮的有效成分之一丹皮酚作为成药质量控制的定量指标。冰片与丹皮酚的含量测定方法分别已有采用气相色谱法测定的文献报道[1~5]。本文以丁香酚为内标物,气相色谱法同时测定冰片与丹皮酚的含量。方法简便易行,结果稳定可靠。
1 仪器与试药
岛津GC-7AG型气相色谱仪,岛津C-R4A色谱数据处理器;冰片对照品,丹皮酚对照品,丁香酚对照品,均由中国药品生物制品检定所提供;醋酸乙酯为分析纯。
2 色谱条件
色谱柱:以Chromosorb W-AW DMCS(60~80目)为担体,涂布l0%PEG-20M 固定相的玻璃柱(Φ3mm×3m);柱温:程序升温;初始温度145℃,初温保持时间为1lmin,最终温度200℃,终温保持时间为15min,升温速率为l0℃/min。进样口温度为240℃;FID检测器;载气(N2)的流速为50ml/min;氢气73.55kPa,空气49.03kPa。
在上述色谱条件下,冰片峰、丹皮酚峰分别与内标物丁香酚峰的分离度均太于l.5,符合要求。
3 线性范围和校正因子的剥定
3.1 冰片与丹皮酚对照品溶液的配制 取冰片对照品200mg,丹皮酚对照品20㎎,置20ml量瓶中,加醋酸乙酯溶解并稀释到刻度。
3.2 内标溶液的配制 取丁香酚适量,加醋酸乙酯制成每毫升含4mg的溶液。
3.3 线性范围 精密吸取对照品溶液l,2,3,4,5ml,分别置于10ml量瓶中,各精密加入内标溶液1ml,用醋酸乙酯稀释至刻度,摇匀。取溶液1ul[u1] 注入气相色谱仪,记录峰面积,以对照品浓度为横坐标,对照品与内标物的色谱峰面积的比值为纵坐标,分别计算冰片、丹皮酚的回归方程。冰片:y1=0.112十4.3074X1,r=0.9996、线性范围0.98~4.9Vg;[u2] 丹皮酚:y2=0.02366+ l.1474 x2,r=0.9991,线性范围0.102~0.6lug[u3] 。
3.4 校正因子的测定 取冰片对照品70mg、丹皮酚7mg,精密称定,置25ml量瓶中。加醋酸乙酯溶解并稀释到刻度,摇匀。精密量取5ml,精密加入内标溶液lml,摇匀。取此溶液lul[u4] 注入气相色谱仪,测定,计算校正因子。
4 精密度试验
取对照品溶液,重复进样6次,计算冰片与内标物、丹皮酚与内标物的色谱峰面积比值的RSD。结果RSP分别为1.2%,1.8%。
5 回收率试验
采用加样回收方法。取已知含量的样品,加入冰片对照品及丹皮酚对照品,按样品含量测定方法操作。结果见表1。
Tab.1 The recovery test(n=5)
Compd. |
Recovery(%) |
RSD(%) | |
Borneol |
1.20 |
99.5 |
1.7 |
Paeonol |
0.12 |
100.3 |
2.4 |
6 重复性试验
取批号为971102的样品6份,按含量测定方法测定冰片与丹皮酚的含量(n=3),其相对标准偏差RSD分别为1.6%和2.0%。
7 样品铡定
精密称取本品约1g,加水10ml,时时振摇使溶解。用醋酸乙酯提取4次(8,5,5,5m1)。提取液合并置25m[量瓶中,加醋酸乙酯至刻度,摇匀。精密量取5ml,精密加入内标溶液lml,摇匀,取此溶液lul[u6] ,色谱进样,见图l,计算含量。结果见表2。
Tab.2 Determination of Borneol and Paeonol in sample(n=3)
No |
Borneol |
Paeonol | ||
contents(㎎/g) |
RSD(%) |
contents(㎎/g) |
RSD(%) | |
970921 |
61.1 |
1.8 |
3.71 |
2.2 |
971102 |
60.4 |
2.7 |
4.44 |
1.7 |
971114 |
65.3 |
2.9 |
4.57 |
3.0 |
8 讨论
8.1 冰片与丹皮酚均易在有机溶剂中溶解。本品是以聚乙二醇6000为辅料制成的滴丸剂。PEG-6000在水中易溶,故采用使滴丸溶解于水,再用有机溶剂提取的方法制各样品溶液。提取4次,第5次提取液进样为结果阴性
8.2 试验选用了不同极性的色谱柱,5%OV-17、1O%PEG-20M,从3种物质的色谱行为进行综合考虑,以l0%PEG-20M 较好。进行了不同柱温的等温试验和程序升温试验,采用程序升温可获得最理想的色谱图。主成分峰、内标物质峰与杂质峰之闻的分离度均符合要求。阴性对照无干扰。
8.3 在建立的色谱条件下,冰片因分离成龙脑峰和异龙脑峰而形成双峰,这与各种文献报道的情形相似 含量计算时,取两峰面积之和计算冰片的含量
(责任编辑:曾少粧)